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pet载体有哪些

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为什么我的扩增后是750bp左右呢? , 在原核表达蛋白时,挑重组菌后放入LB液体培养基中培养10h(忘记加卡那霉素),之后再取100ul转移到10ml的培养基(加了卡那霉素)中扩大培养,由于用的是原核表达载体PET28a,属于卡那抗性,这样影响大不大? , 做了近一个月的蛋白表达,一直表达不出来,请大家帮我分析一下。

载体pET29b, 目的基因长度726bp,GC%含量:66.53%,蛋白241aa。

做的是原核基因的His 融合蛋白表达;

一开始用得是表达菌株是BL21(DE3)和BL21(DE3) pLysS, 第一次电泳预期片段...

pet载体比较pbr322有哪些优点: :运载体就是用来转运基因片段的,如质粒。表达载体是可将 运载体 转运来的基因片段进行表达的,它含有启动子,终止子等。就是 运载体 将转运的基因插入到 表达载体 所含有的元件中(启动子,终止子),最后转录。

pET-32a携带标签大小究竟是多少?: xiewen83(站内联系TA)我也不知道,学习一下!zysshine(站内联系TA)6个组氨酸和19KD左右的硫氧还蛋白再加上你的 目的蛋白sin_007(站内联系TA)载体上有Trx.Tag , His.Tag , S.Tag。 trx-tag 有12KD,2个HIS标签,每个有0.8KD,若你所表达序列有终止密码子的话,只表达一个his标签,s-tag有1.7KD,再加上你的目的序列所表达出来的蛋白就融合蛋白的总大小。muchong5577(站内联系TA)有文献报道:加了his标签的表达蛋白在sds的时候分子大小会产生偏差。wordsworth3180(站内联系TA)我跑电泳看到的载体蛋白大概有16-17kdly888lsp(站内联系TA)6个组氨酸和19KD左右的硫氧还蛋白再加上目的蛋白DDDD

pet22b空载体利用通用引物扩增后目的条带多大?: 这个查下质粒图谱,一般的载体都是200bp左右吧
你把扩增产物测序就知道了,可能是别人给你的载体上已经有插入片段了

在原核表达蛋白时,由于用的是原核表达载体PET28a,属于卡那抗性,但忘加卡那了,这样影响大不大?: 理论上影响是比较大的,原核LB培养不加抗生素的话,很容易出现丢失了带有外源基因质粒的生长速度比目的菌的生长速度快得多的情况。最后的结果就是影响目的蛋白的表达量。
所以如果这个蛋白表达培养的实验是第一次做的话,建议重做一遍以保证数据的准确。如果不是第一次做的话,可以对比下之前的表达数据验证下是否有影响。

pet-32a载体在进行原核表达的时候与目的基因连接时不需要酶切吗: 需要啊,首先载体与目的基因酶切后,再用T4DNA连接酶连接起来,然后转化感受态

pET29b表达载体,一直表达不出蛋白!急!: 是不是西游密码子问题啊,换个菌株试试,我有ROSETTA-GAMI。我用32+载体,表达量还可以。可以交流。zhangyingbiao@126.com

petduet载体为什么可以表达2个外源基因: pp铝膜pet铝膜区别:
()聚丙烯简称PP 俗称百折胶毒、味乳白色薄透明聚合物
聚苯二甲酸乙二醇酯简称PET或PETP俗称涤纶树脂乳白色高度结晶性聚合物与PBT起统称热塑性聚酯
(二)PPPET产品特性:
PP制品耐热120度PET能耐热60度左右两者超各自耐热范围都变形且散发毒性
(三)PPPET硬度:
PP软韧性PET硬刚性同同厚度产品PET要比PP硬
PP具良耐热性熔点164-170度制品能100度温度高温消毒;脆化温度-35度
PET耐蠕变、抗疲劳性、耐摩擦、尺寸稳定性磨耗少、具热塑性塑料韧性制品期使用温度达120度短期使用达150度脆化温度-70度

问个问题哦,我进行的是原核蛋白表达,表达载体是PET32a,表达菌液超声后在上清电泳条带很好,可是没有酶活: 首先得判断蛋白条带是否正确,因为32a表达过程中,会在目标蛋白上加上部分自己序列,所以电泳图谱中你所要表达的蛋白,应该比你自己预期的大20-30kDa。
其次,原核表达,只是表达了酶蛋白序列,但蛋白序列与酶之间不能划等号,要有一个正确的加工之后形成合适的二、三级结构,蛋白才有活性

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